임상시험센터 면역질환 임상중개연구실은 임상연구자와 기초 연구자간의 유기적 인프라 구조를 기반으로 약물이상반응 관련 약물유전체 연구, 알레르기성 면역질환의 분자 및 면역학적 기전 연구, 약물유전체 정보 및 임상양상에 따른 최적의 맞춤치료 기반 기술 개발 연구, 약물 유발 간손상 및 피부 중증 약물이상반응 연구, 오믹스 연구기법 기반 바이오마커 발굴 및 조기 진단기술 개발 등 임상과 기초과학이 융합된 임상중개연구를 효율적으로 수행하고 있습니다.

본 연구실은 아주대학교의료원 연구중심병원 R&D육성사업 과제 (수요자요구 맞춤형 면역질환 임상중개연구 플랫폼 구축 및 확산 DEPEND - Decision Support Platform-based on Clinical Translational Research for Immunological Diseases-Project)의 핵심 연구실로 선정되어 면역질환관련 임상중개연구를 수행하고 있습니다. 또한, 기초 연구자 - 임상 연구자 - 산업계 연구자 간의 유기적 인프라 구조를 기반으로 국내-외 연구자에게 다양한 임상중개연구서비스를 제공합니다. 임상중개연구서비스는 내외부 연구자와의 토의를 거쳐 확대 가능합니다.

• A. 임상중개연구 샘플링
  • ① 혈액유래세포 분리 및 보관
    

    • 분석 방법 :

      • 말초혈액을 Lymphoprep™ (or Ficoll-Paque™)에 상층 하여 원심분리방법으로 분리함
      • PBMC, T and B cell, erythrocyte 분리 및 보관 가능

    • 검체 종류 :

      • 혈액, 당일 오전 채혈

    • 적용 범위 :

      • 림프구 활성능 측정, 형광이용 면역세포 활성능 분석, 오믹스 연구, 바이오마커 발굴 연구
  • ② 다양한 검체 분리 및 보관

    • 검체 종류 :

      • 혈청(Serum), 혈장(Plasma), 객담(Sputum), 소변 (Urine)

    • 분석 방법 :

      • 혈청 : Serum separate tube (SST) 에 채혈 후 원심분리하여 상층액 분주하여 -80℃ 보관
      • 혈장 : Heparin, EDTA 등의 coagulate tube에 채혈 후 원심분리 한 뒤에 상층액을 분주하여 -80℃ 보관
      • 객담 : 객담의 점액성분에 PBS를 넣고 잘 섞어준 후 세포 수를 측정하고 원심분리. 상층액에는 단백질 변성 방지 용액을 첨가한 후 분주하여 -80℃ 보관. 세포 에는 용도에 맞는 버퍼를 넣어 -80℃ 에 보관.
      • 소변 : 50ml conical tube에 urine을 넣고 원심분리 하여 부유물을 가라 앉힌 후 상층액을 분주하여 -80℃ 보관

    • 적용 범위 :

      • 약물 유효성 평가, 바이오마커 발굴연구, 오믹스 연구
  임상중개연구서비스 신청서
• B. 모델 기반 유효성 평가
  • ① 체외 자극 실험 (ex vivo stimulation assay)

    • 분석 방법 :

      • 전혈을 이용하여 칼슘운반체 (calcium ionophore) 자극에 의한 세포 활성능 측정
      • 치료제 후보 물질을 사전 처리하여 세포 활성능 억제 효능 검증
      • 치료제 후보 물질의 작용 기전 검증

    • 검체 종류 :

      • 전혈, 당일 오전 채혈

    • 적용 범위 :

      • 치료제 후보물질의 유효성 평가
  • ② 세포 주 모델 기반 신약 후보물질 유효성 평가

    • 세포 주 종류 :

      • 호산구세포, 단핵구세포, 비만세포, 기도평활근세포, 기도상피세포 등

    • 분석 방법 :

      • 다양한 동물 세포 주 모델을 활용하여 면역조절제 후보 물질의 면역염증 억제 효능 검증
      • LAD2 비만 세포 주에 다양한 약물 처리 후 beta-hexosaminidase 또는 histamine 을 측정하여 탈 과립 정도 평가
      • 유세포분석기를 이용한 활성인자 표지 물질 발현 측정
      • ELISA 기반 사이토카인 측정

    • 적용 범위 :

      • 면역 염증 세포 활성 억제 능 측정. 새로운 치료전략 수립
  • ③ 기타 분석 서비스

    • ELISA 분석 :

      • 상담 후 결정

    • FACS 분석 :

      • 면역세포 phenotype 분석, 세포 주를 이용한 수용체 발현 측정, 세포 내 발현여부 및 발현 정도 변화 측정
  임상중개연구서비스 신청서
• C. 면역과민반응평가
  • ① 림프구 활성능 검사 (Lymphocyte transformation test)
    

    • 분석 방법 :

      • 혈액으로부터 말초혈액 단핵구세포 (PBMC) 분리
      • PBMC에 원인 약물을 농도별로 처리 후 5일 배양 후 thymidine incorporation assay를 진행하여 약물에 대한 림프구 반응성 측정
      • 림프구 활성인자 발현은 유세포 분석기 (flow cytometry)를 이용하여 활성인자 표지 물질 (예. CD107a, Granzyme B 등) 발현 측정
      • 림프구 반응성 조사

    • 검체 종류 :

      • 혈액, 당일 오전 채혈

    • 적용 범위 :

      • 항원 물질 특이 림프구 활성능 측정, 약물 면역원성 스크리닝, 약물유해반응의 빈도와 양상, 위험인자 확인
  • ② 호염기구 활성능 검사 (Basophil activation test)
    

    • 분석 방법 :

      • 혈액에서 적혈구를 제거한 백혈구에 항원을 처리한 후 호염기구 활성마커로 염색
      • 유세포분석기를 이용하여 항원에 의한 호염기구 활성 정도 측정

    • 검체 종류 :

      • 혈액, 당일 오전 채혈

    • 적용 범위 :

      • 항원 물질 특이 호염기구 활성 측정, 위험인자 알레르기 반응 정도 예측, 면역치료 효과 판정
  • ③ 항원 특이 면역글로불린 검사 (Allergen specific immunoglobulin)
    

    • 분석 방법 :

      • 항원 성 물질 (추출 또는 알부민 접합체 제조)을 하루 전 코팅
      • 환자의 혈청과 반응시키고 ELSIA 방법을 이용하여 항원 특이 면역글로불린 측정
      • 교차반응 성 검사

    • 검체 종류 :

      • 혈청 또는 혈장

    • 적용 범위 :

      • 항원특이 면역글로불린 확인, 알레르기 원인 물질 확인
  임상중개연구서비스 신청서
• D. 연구 기자재 지원 서비스

  유세포분석기 (Flow cytometry)

  • 보유장비 BD bioscience cantoⅡ, FSC-SSC 포함 6 color 측정 가능
  • 직접 분석이 불가능 한 경우 분석 서비스 상담 요망

  Agilent 2100 bioanalyzer

  • 보유장비 Agilent 2100 bioanalyzer, DNA, RNA, Protein QC 가능
  • 관련 chip 및 시약은 별도 구매

  Real time PCR (ABI 7500)

  • 보유장비 Applied Biosystem, 7500 Real Time PCR System

  Deep freezer

  • 보유장비 Thermo, Forma ULT freezer 706
• • 문의

  • 모든 서비스는 담당 교수와 상담 후 진행됩니다. 메일로 연락주시기 바랍니다.
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    담당 교수: 김승현 kimsh@ajou.ac.kr
    담당 연구원:양은미 / Tel. 031-219-4263, e-mail. eun0118@aumc.ac.kr

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